Пенициллины

 

Пенициллины

 

402_01

 

Медицинские препараты пенициллина представляют в основном бензилпенициллин в виде натриевой и кальциевой солей.

Качественные реакции

Пенициллин восстанавливает ряд соединений, что используется для установления подлинности препарата.

1.  С аммиачным раствором окиси серебра выделяется металлическое серебро на холоду.

2.  Реактив Майера в присутствии щелочи восстанавливается до ртути (темный осадок). При последующем прибавлении реактивов Шайблера и Зонненшейна появляется голубое окрашивание.

3.  Йодноватая кислота восстанавливается с появлением желтого окрашивания.

4.  Раствор пенициллина в растворе едкого натра при прибавлении красной кровяной соли с хлоридом железа дает синее окрашивание. ³

5.   При прибавлении 2 мл серной кислоты и 0,1 мл раствора резорцина (концентрированный раствор с добавлением нескольких кристаллов бромида калия) к сухому пенициллину при нагревании появляется зеленое окрашивание, усиливающееся при нагревании.

6.  Раствор пенициллина с раствором Люголя после удаления йода нагреванием смеси приобретает розово-красное окрашивание (кислые растворы нейтрализуют до и после прибавления реактива аммиаком).

О других реакциях см. Ваксмут - Waksmuth (1952). Кристаллы пенициллина представлены на рис. 64.

Количественное определение

1. Йодометриче-ский метод. Бензил-пенициллин не окисляется йодом, в то время как пе-

нициллоиновая кислота - продукт инактивации пенициллина пени-циллиназой или щелочью - поглощает в определенных условиях 8 эквивалентов йода на моль. Продукт гидролиза 1 мг кристаллического бензилпенициллина реагирует с 2,52 мл 0,01 н. раствора йода.

403_01

 

403_02

 

5 мл раствора, содержащего приблизительно 0,6 мг препарата на 1 мл, оставляют на V₄ часа при обыкновенной температуре с 5 мл

1 н. раствора едкого натра. Затем прибавляют 5,5 мл 1 н. раствора соляной кислоты (слабокислая среда благоприятствует окислению йодом) и 15 мл 0,01 н. раствора йода. Снова оставляют на 15 минут и титруют избыток йода 0,01 н. раствором тиосульфата натрия. Одновременно ставят слепой опыт с пенициллином, но без щелочи и кислоты. Разница в количестве израсходованного йода при обоих опытах указывает на количество его, прореагировавшее с продуктами гидролиза пенициллина (Н. А. Преображенский, Э. И. Генкин, 1953; Мундель - Mundell и др., 1946; Алицино - Alicino, 1946). По некоторым данным для такого строго стехиометрического протекания реакции требуется забуференная ацетатным или фталатным буфером среда (рН 4,5). Грамм-эквивалент равен V_B моля пенициллина.

2.   Бромометрический метод основан на воздействии брома в кислой среде (Фогт - Fogt, 1954).

К 2-5 мл водного раствора, содержащего 2-3 мг натриевой соли бензилпенициллина, добавляют 3 мл 16%-ной серной кислоты, 10 мл 0,01 н. раствора бромата калия и 0,5 г бромида калия и оставляют на 30 минут на свету при комнатной температуре. Затем добавляют 0,3 г йодида калия и выделившийся йод титруют 0,01 н. раствором тиосульфата натрия. 1 мл 0,01 н. раствора бромата калия соответствует 0,4455 мг натриевой соли бензилпенициллина.

Из других методов укажем весовое определение бензилпенициллина, основанное на образовании соли с N-этилпиперидином, трудно растворимой в смеси амилацетата с ацетоном. Другие известные до сего времени пенициллины таких осадков не образуют.

3.   Колориметрический метод. Продукт взаимодействия пенициллинов с гидр окси л амином (гидроксамовые кислоты) с хлорным железом дает красное окрашивание (Форд - Ford, 1947).

Метод менее точен, чем вышеприведенный йодометрический. Другой колориметрический метод, основанный на конденсации пенициллина с нафтил-4-азобензол-№этилендиамином, см. в работе Скуди (Scudi, 1946).

Алкалиметрические методы имеют своей основой инактивацию пенициллина в водных, небуферных растворах пенициллиназой и компенсацию появляющегося при этом сдвига рН щелочью (Мур-таф - Murtaugb и др.,  1945).

4. Совершенно на другом принципе построен метод определения безил-пенициллина, описанный Г. Е. Владимировым и А. Н. Климовым (1954).

Нитрованием фенил ацетильной группировки бензил-пенициллина получают нитропроизводное, продукт реакции которого с гидр оксиламином в аммиачной среде дает стойкое фиолетовое окрашивание, удобное для колориметрирования. Определение проводят в фотоэлектрическом колориметре. Слепой опыт с инактивацией пенициллина щелочью в таких же условиях как и при основном дает возможность внести поправку в определение из-за возможного присутствия примесей, имеющих фенильные группировки.

Для определения пенициллина в препарате новокаин-пенициллина предложен йодометрический метод, причем новокаин определяют титрованием раствором щелочи при индикаторе фенолфталеине в присутствии спирта и хлороформа.

Имеет практическое значение определение этиленгликоля в новокаиновой (прокаиновой) соли пенициллина (Бриккер - Bricker и др., 1953), так как при стерилизации этой соли окисью этилена последний может частично гидролизоваться в присутствии влаги и образовывать этиленгликоль, который весьма токсичен.

Для количественного определения этиленгликоля в новокаиновой соли пенициллина препарат обрабатывают йодной кислотой, а выделяющийся формальдегид определяют колориметрически с помощью хромотроповой кислоты. Йодноватую и йодную кислоты удаляют ацетатом свинца, так как они мешают реакции формальдегида с хромотроповой кислотой. Количество этиленгликоля определяют по калибровочной кривой, построенной по образцу новокаиновой соли пенициллина с различным содержанием этиленгликоля:

405_01

 

В специальной литературе описаны: потенциометрический метод (А. Т. Па-сынский, П. Засыпкина, 1953), определение в виде медных солей гидрокса-мовых кислот (С. Т. Плигин, А. И. Портнов, 1956).

Биологический контроль пенициллина описан в приложении I к ФУШ.

25.06.2015