13. Acidum folicum

 

13. Acidum folicum

Кислота фолиевая

N-{4'-[ (2-амино-4-окси-6-птеридил) -метил]-амино}-бензоил-L( + )-глютаминовая кислота

 

C_I9H₁₉N₇0₆                                                                                                         M. в. 441,4

Описание. Желтый или желто-оранжевый кристаллический порошок без запаха и вкуса. На свету разлагается, гигроскопичен.

Растворимость. Практически нерастворим в воде, 95% спирте, ацето­не, бензоле, эфире и хлороформе, мало растворим в разведенной соля­ной кислоте, трудно растворим в разведенной серной кислоте, легко растворим в растворах едких щелочей.

Подлинность. 0.01 г препарата растворяют в 5 мл 0,1 н. раствора ед­кого натра, приливают 5 мл 0,1 н. раствора соляной кислоты и 1 мл рас­твора перманганата калия. Раствор помещают на 3 минуты в водяную баню с температурой 80-85°. К охлажденному раствору прибавляют по каплям 0,2 мл раствора перекиси водорода и фильтруют. Фильтрат имеет голубую флюоресценцию в ультрафиолетовом свете.

0,001% раствор препарата в 0,1 н. растворе едкого натра имеет мак­симумы поглощения при 256, 283 и 365 нм.

Потеря в весе при высушивании. Около 0,5 г препарата (точная на­веска) сушат до постоянного веса в вакууме при температуре 110° и остаточном давлении 15-20 мм рт. ст. Потеря в весе не должна превы­шать 8,5%.

Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 0,5 г пре­парата не должна превышать 0,3 % и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001 % в препарате).

Количественное определение проводят одним из приведенных ниже методов.

1. Около 0,05 г препарата (точная навеска) растворяют в смеси 50 мл воды и 2 мл концентрированного раствора аммиака в мерной колбе емкостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и переме­шивают.

1 мл испытуемого раствора переносят в мерную колбу емкостью 50 мл, доводят объем раствора до метки раствором двузамещенного фосфата калия и перемешивают.

В две колбы емкостью 50 мл наливают по 5 мл рабочего раствора стандартного образца фолиевой кислоты (колбы № 1 и № 2). В две дру­гие колбы наливают по 5 мл испытуемого раствора (колбы № 3 и № 4). В пятую колбу наливают 5 мл раствора двузамещенного фосфата калия (колба № 5).

В колбы № 1 и 3 наливают по 1 мл 0,4% раствора перманганата ка­лия, а в колбы № 2, 4 и 5 - по 1 мл воды. Содержимое колб перемеши­вают и оставляют на 2-3 минуты. Затем во все колбы приливают по 1 мл 2% раствора нитрита натрия и по 1 мл раствора соляной кислоты, получаемого смешиванием 4 объемов концентрированной соляной кис­лоты и 6 объемов воды, хорошо перемешивают и оставляют на 2 мину­ты. Во все колбы приливают по 1 мл 5% раствора сульфамата аммония или сульфаминовой кислоты, осторожно перемешивают вращательным движением, пока не прекратится выделение пузырьков газа. Во все кол­бы приливают по 1 мл 0,1% раствора N-(1-нафтил)-этилендиамина ди-гидрохлорида, хорошо перемешивают и оставляют на 10 минут. Изме­ряют оптическую плотность растворов на фотоэлектроколориметре со светофильтром с максимумом пропускания 550 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

Измерение проводят против контрольного раствора (колба № 5).

Содержание безводной фолиевой кислоты в препарате в процентах (X) вычисляют по формуле:

где   D₁, D₂, D₃, D₄- оптические плотности растворов в колбах № 1, 2,

3,4; С- содержание безводной фолиевой кислоты в 1 мл

раствора стандартного образца в миллиграммах; а- навеска препарата в граммах.

Примечание.   1.  Приготовление основного раствора стандарт­ного образца фолиевой кислоты. Около 0,05 г стандартного образ­ца фолиевой кислоты (точная навеска) растворяют в смеси 50 мл воды и 2 мл концентрированного раствора аммиака в мерной колбе емкостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и хорошо перемешивают. Прибавляют несколько капель толуола. Хранят в прохладном месте в темноте. Основной раствор стандарт­ного образца годен в течение 1 месяца.

2. Приготовление рабочего раствора стандартного образца фолиевой кислоты. 1 мл основного раствора стандартного образца поме­щают в мерную колбу емкостью 50 мл и доводят объем раствора до метки раствором двузамещенного фосфата калия. Рабочий раствор стандартного образца содержит 0,01 мг фолие-вой кислоты в 1 мл; годен в день приготовления.

2. Около 0,05 г препарата (точная навеска) растворяют в 0,05 мол растворе карбоната натрия в мерной колбе емкостью 50 мл, доводят объем до метки тем же раствором и перемешивают. Из полученного раствора отбирают 5 мл, добавляют 5 мл 0,05 мол раствора карбоната натрия и 10 мл 0,1 мол раствора хлорида аммония в 30% спирте. Раствор помещают в ячейку полярографа, термостатированную при 25°, пропускают ток азота в течение" 5 минут и снимают полярограмму, на­чиная с 0,6 в.

Содержание безводной фолиевой кислоты в препарате в процентах (X) вычисляют по формуле:

где С - количество безводной фолиевой кислоты, найденной по калибро­вочному графику, в миллиграммах в 1 миллилитре; а - навеска препарата в граммах.

Примечание. Построение калибровочного графика. Около 0,05 г стандартного образца фолиевой кислоты (точная навеска) раство­ряют в 0,05 мол растворе карбоната натрия в мерной колбе емкостью 50 мл, доводят объем тем же раствором до метки и пере­мешивают. Из полученного раствора отбирают 3, 4, 5, 6, 7, 8 мл, до­водят объем каждого раствора до 10 мл 0,05 мол раствором карбо­ната натрия и приливают по 10 мл 0,1 мол раствора хлорида аммо­ния в 30% спирте. Полученные растворы поочередно помещают в термостатированную при 25° ячейку полярографа и снимают поля-рограммы, начиная с 0,6 в. Калибровочный график строят, отклады­вая по оси ординат силу тока в микроамперах, пропорциональную высотам волн, а по оси абсцисс - соответствующие концентрации фолиевой кислоты в миллиграммах в 1 мл раствора.

Содержание С₁₉Н₁₉N₇О₆ должно быть не менее 95,0% в пересчете на сухое вещество.

Хранение. В хорошо укупоренной таре, предохраняющей от действия света.

Витамин комплекса В.

29.06.2015