139. Celanidum

 

139. Celanidum

Целанид

 

Lanatosidum С*

С₄₉Н₇₆0₂₀                                                                                                  М. в. 985,1

Гликозид, получаемый из листьев наперстянки шерстистой (Digitalis lanata Ehrh.).

Описание. Бесцветный или белый кристаллический порошок без за­паха. При хранении на воздухе поглощает до 7,5% влаги.

Растворимость. Очень мало растворим в воде, трудно растворим в 95% спирте, растворим в метиловом спирте, мало растворим в эфире, хлоро­форме и петролейном эфире.

Подлинность. К раствору 1-2 мг препарата в 1 мл 95% спирта при­бавляют 1 мл раствора нитропруссида натрия и 1-2 капли раствора едкого натра; появляется постепенно исчезающее красное окрашивание.

1-2 мг препарата растворяют в 2 мл ледяной уксусной кислоты, со­держащей 0,05% хлорида окисного железа. Полученный раствор осто­рожно по стенке вливают в пробирку с 2 мл концентрированной серной кислоты; на границе двух слоев появляется бурое или темно-бурое окра­шивание; верхний слой постепенно окрашивается в сине-зеленый или синий цвет.

Посторонние гликозиды. 5 мг препарата растворяют в 1 мл смеси хло­роформа и метилового спирта (1 : 1). 0,025 мл полученного раствора наносят с помощью микропипетки на линию старта на полосе быстро-фильтрующей бумаги для хроматографии (16x50 см), предварительно пропитанной 30% раствором формамида в метиловом спирте, отжатой между листами фильтровальной бумаги и подсушенной на воздухе в те­чение 15-20 минут. Бумагу помещают в камеру и хроматографируют нисходящим способом в течение 3-4 часов, не давая фронту раствори­телей дойти до конца полосы. В качестве подвижной фазы растворите­лей используют смесь хлороформ-диоксан-к-бутиловый спирт 7:2:0,5, насыщенную формамидом. Хроматограмму вынимают из камеры, подсу­шивают на воздухе в течение 15-20 минут, затем сушат в сушильном или в вакуум-сушильном шкафу в течение 30 минут при 120°. Сухую хроматограмму опрыскивают или смачивают свежеприготовленным 25% раствором трихлоруксусной кислоты в хлороформе, содержащем хлор­амин Б (0,2г хлорамина Б в 100 мл раствора трихлоруксусной кислоты). Затем хроматограмму вновь выдерживают 5 минут в сушильном шкафу при 120°, вынимают из шкафа и просматривают в ультрафиолетовом свете. На хроматограмме должно быть отчетливо видно синее пятно целанида с Rf около 0,39. Допускается другое, сине-голубое пятно лана-тозида D с Rf около 0,17; не должны обнаруживаться пятна других гликозидов.

Потеря в весе при высушивании. Около 0,2 г препарата (точная на­веска) сушат в вакуум-эксикаторе над пятиокисью фосфора в течение 24 часов. Потеря в весе не должна превышать 7,5%.

Сульфатная зола из 0,2 г препарата должна быть невесомой.

Количественное определение. Около 0,025 г препарата (точная навес­ка) растворяют в смеси хлороформа и метилового спирта (1:1) в мер­ной колбе емкостью 5 мл.

Полосу быстрофильтрующей бумаги для хроматографии (16X50 см) размечают вдоль на 4 равные полосы по 4 см шириной каждая, хорошо пропитывают в 30% (по объему) растворе формамида в метиловом спирте, отжимают между листами фильтровальной бумаги и подсуши­вают на воздухе в течение 15-20 минут. На линию старта, отстоящую на 10-12 см от узкого края полосы бумаги, в 3 точки, расположенные в центрах полос, наносят по 0,02 мл испытуемого раствора; четвертую полосу оставляют как контрольную. Хроматограмму помещают в камеру и хроматографируют, как указано выше (см. «Посторонние гликозиды»). Высушенную хроматограмму разрезают вдоль на отдельные полосы по линиям, обозначенным заранее карандашом. Первую из исследуемых по­лос протягивают в фарфоровой чашке через описанный выше раствор проявителя. После этого полосу сушат 1-2 минуты на воздухе, затем в сушильном или в вакуум-сушильном шкафу при температуре 120° и наблюдают свечение пятен в ультрафиолетовом свете, отмечая границы пятен на полосе карандашом.

Проявленную полосу с исследуемым веществом прикладывают к дру­гим (непроявленным) полосам так, чтобы линии старта совпали. Затем вырезают из полос с исследуемым веществом отмеченные участки раз­мером 8X4 см, расположенные против зоны целанида. При необходимо­сти недостающую площадь участка дополняют обрезками бумаги от контрольной полосы. Участки бумаги с целанидом помещают в пробир­ки 2x20 см и заливают 10 мл свежеприготовленного ксантгидролового реактива. Одновременно вырезают из контрольной полосы участок бу­маги такого же размера и заливают 10 мл того же реактива. Пробирки помещают в водяную баню (или сушильный шкаф) при 60° на 1 час, за­тем охлаждают холодной водой 5 минут и оставляют на 30 минут при комнатной температуре, после чего растворы колориметрируют против воды с зеленым светофильтром (максимум около 512 нм) в кюветах с толщиной слоя 1 см, закрытых (обязательно) крышками. Нулевую точку находят по раствору с контрольной бумажкой против воды. По ка­либровочному графику находят концентрацию целанида в микрограммах в 1 мл колориметрируемого раствора.

Содержание целанида в процентах (X) вычисляют по формуле:

где а - количество целанида в 1 мл колориметрируемого раствора, най­денного по калибровочному графику, в микрограммах; б - объем колориметрируемого раствора в миллилитрах; в - количество раствора, нанесенного на хроматограмму, в милли­литрах; г - объем испытуемого раствора, в миллилитрах; д - навеска целанида в граммах в пересчете на сухое вещество. Содержание С₄₉Н₇₆О₂₀ должно быть 95,0-105,0% в пересчете на сухое вещество.

Для построения калибровочного графика готовят  стандартный  рас­твор, для чего  0,025 г (точная   навеска)   специально  приготовленного стандартного образца целанида помещают в мерную колбу емкостью 25 мл и растворяют в смеси хлороформа и метилового спирта (1 : 1).

Описанным выше способом, но без нанесения вещества, готовят кон­трольную хроматограмму, помещают в камеру, прогоняют растворители и высушивают. Высушенную хроматограмму разрезают на полосы раз­мером 8X4 см и наносят раствор стандартного образца в количестве: 0,01, 0,05, 0,10 и 0,12 мл, что соответствует содержанию 1, 5, 10 и 12 мкг целанида в 1 мл колориметрируемого раствора.

Полосы бумаги просушивают на воздухе, помещают по отдельности в пробирки и заливают каждую 10 мл свежеприготовленного ксантгид-ролового реактива. Далее поступают, как описано выше в ходе количе­ственного определения.

При построении калибровочного графика на оси ординат откладывают оптическую плотность, а на оси абсцисс - концентрацию целанида в мкг в 1 мл колориметрируемого раствора.

Примечание. 1. Особое внимание нужно обратить на удаление паров формамида при сушке хроматограммы, так как присутствие следов формамида в колориметрируемых растворах приводит к ос­лаблению интенсивности их окраски.

• 2. Контрольный раствор для установления нулевой точки фото-электроколориметра делать для каждой хроматограммы.
• 3. Смесь растворителей для хроматографирования. В делитель­ную воронку емкостью 250 мл помещают 70 мл хлороформа, 20 мл диоксана, 5 мл н-бутилового спирта и около 10 мл формамида. Смесь тщательно встряхивают в течение 10 минут и оставляют рас­слаиваться (в течение 18-20 часов). Нижний слой (подвижная фа­за) отделяют и помещают в кювету для нисходящей хроматогра­фии. Небольшое количество подвижной фазы наливают в стаканчик и помещают на дно камеры для насыщения парами смеси раствори­телей в течение 20-24 часов. Хроматографирование проводят при постоянной температуре в темном месте.

Биологическая активность. Активность препарата определяют биологи­ческим методом (стр. 928).

1 г препарата должен содержать 14 000-16 000 ЛЕД или 3200-3800 КЕД.

Хранение. Список А. В герметически укупоренных банках оранжевого стекла.

Высшая разовая доза внутрь 0,0005 г.

Высшая суточная доза внутрь 0,001 г.

Высшая разовая доза в вену 0,0004 г.

Высшая суточная доза в вену 0,0008 г. См. также статьи «Solutio Cela-nidi 0,05%» и «Solutio Celanidi 0,02% pro injectionibus».

Сердечное (кардиотоническое) средство.

29.06.2015